伪狂犬病毒TK基因转移载体构建及LacZ基因表达

摘要：

在扩增、克隆PRVtk、gH基因的基础上,构建了包含tk和gH基因片段的转移载体质粒pTK2.5.以PRV糖蛋白gG启动子(PgG)为控制外源基因表达的启动子,以E.colilacZ为报道基因,用其替换pTK2.5质粒tk区的SalI与XhoI之间的序列,构建了转移载体质粒pTK-LacZ.瞬时表达证实,转染细胞的pTK-lacZ质粒在野生型PRV感染的情况下,能有效表达β-Gal酶活性.将pTK-lacZ转染BHK21细胞后再以PRV感染进行同源重组,在143TK-细胞上经5-溴脱氧尿苷选择,Vero细胞纯化,X-Gal染色,蓝斑筛选,分离到重组体PRV(rPRV).rPRV与野生型PRV在细胞上具有类似的生长特性,且经过连续传代的rPRV仍能稳定的表达β-Gal酶活性.

关键词：伪狂犬病毒、胸苷激酶基因、转移载体、LacZ基因

所属期刊栏目：46

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：湖北省武汉市科技攻关项目962001018

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：717-720