过表达Bmi-1促进CD133+CD44+HCT116结肠癌干细胞发生上皮间质转化

摘要：

目的 探讨Bmi-1促进结肠癌干细胞发生迁移、侵袭的作用及机制.方法 常规培养结肠癌HCT116细胞,成球培养基法(SFM)和磁珠分选法(MACS)富集和筛选CD133+CD44+HCT116结肠癌干细胞;流式细胞学鉴定结肠癌干细胞CD133和CD44表型,体外平板克隆实验和CCK8法鉴定细胞增殖克隆能力,裸鼠体内成瘤实验鉴定细胞致瘤能力.构建过表达Bmi-1质粒并转染CD133+CD44+HCT116结肠癌干细胞,Western blotting验证细胞中Bmi-1、E-cadherin及Vimentin的表达情况.平板划痕实验和Transwell实验评价转染后不同细胞的迁移和侵袭能力.结果 CD133+CD44+HCT116结肠癌细胞具有更强的体外克隆增殖能力和体内致瘤能力,可作为结肠癌干细胞研究模型;过表达Bmi-1后促进CD133+CD44+HCT116结肠癌干细胞的E-cadherin表达下降,而Vimentin表达上升;过表达Bmi-1后细胞24 h迁移速度为(18.44±0.59)μm/h,明显高于对照组(1.88±0.21)μm/h和普通组(1.92±0.36)μm/h(P＜0.05),同时其侵袭细胞数(37.67±2.51)也明显高于对照组(9.33±0.58)和普通组(7.67±0.58)(P＜0.05).结论 Bmi-1介导CD133+CD44+HCT116结肠癌干细胞发生上皮间质转化(EMT)而促进肿瘤侵袭、转移.

关键词：Bmi-1;结肠癌干细胞;上皮间质转化;迁移;侵袭

所属期刊栏目：30

分类号：R735.3(肿瘤学)

资助基金：广东省人民医院研究基金;广东省医学科学技术研究基金

在线出版日期：2021-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：841-845