幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位编码基因的克隆与序列分析

摘要：

目的幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)热休克蛋白A亚单位的编码基因(hspA)克隆和序列分析,为H.pylori基因工程疫苗的研究奠定基础.方法应用PCR方法获得国内分离H.pylori菌株MEL-HP27和国际标准参考株H.pylori的hspA基因,通过定向克隆的方法分别插入克隆载体pNEB193中,用质粒酶切电泳和特异PCR方法鉴定重组质粒.克隆基因经测序后进行核苷酸和氨基酸的同源性比较.结果重组质粒经双酶切后得到0.35kb的hspA基因片段,特异PCR可扩增出hspA基因片段,证实H.pylorihspA基因的重组克隆质粒构建成功.经测序,国内分离HpMEL-HP27的hspA基因全长357bp(Genbank收录号:AY295084),编码由118个氨基酸残基组成的肽链,hspA基因序列与GenBank公布的H.pylori相应基因同源性高达95.20%～97.48%,氨基酸序列同源性在95.76%～97.46%之间.结论克隆了H.pylori菌株MEL-HP27的hspA基因,其核酸序列与国际参考株NCTC11637同源性为97.48%.

关键词：幽门螺杆菌、hspA基因、基因克隆、序列分析

所属期刊栏目：13

分类号：R3(基础医学)

资助基金：河南省医学科技人才创新工程项目2000-84;河南省科技攻关项目0424410035;河南省重点学科开放实验室基金

在线出版日期：2005-01-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：569-571