幽门螺杆菌lpp20基因与麦芽糖结合蛋白基因的融合表达与纯化

摘要：

目的研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)lpp20基因与麦芽糖结合蛋白基因的融合表达产物的纯化方法,为幽门螺杆菌基因工程疫苗的制备建立基础.方法采用本研究室分离的HpMEL-HP27菌株提取染色体DNA,用PCR方法从HP染色体DNA上扩增出lpp20基因片段,将目的基因插入到表达载体pMAL-c2X中,用重组质粒转化大肠杆菌(E.coli TB1).采用IPTG进行诱导表达.用多糖树脂(amylose resin)作为填充料,制备层析柱,将可溶性菌体蛋白进行亲和层析.应用SDS-PAGE方法对纯化产物进行分析.结果融合蛋白的分子量约为60 kDa,融合蛋白的表达量约占全菌总蛋白的34%;纯化后的融合蛋白纯度达90%以上.结论与麦芽糖结合蛋白基因融合的lpp20基因在E.coli TB1中能够高效表达;用多糖树脂作为填充料,进行亲和层析的方法,具有良好的纯化效果.

关键词：幽门螺杆菌、蛋白纯化、lpp20基因

所属期刊栏目：12

分类号：R57(消化系及腹部疾病)

在线出版日期：2004-01-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：346-348