放射敏感性启动子调控CD基因/5-FC自杀系统慢病毒载体的构建及125I诱导表达的研究
合成了含8个CArG元件的放射敏感性启动子E8,将其连接于胞嘧啶脱氨酶(Cytosine Deaminase,CD)基因及GFP报告基因上游,构建了重组慢病毒载体pGC-FU- E8 codA- GFP.与慢病毒包装系统共转染293T细胞包装重组慢病毒颗粒E8 -coda- GFP LV,研究重组慢病毒感染EJ细胞在不同剂量125I的电离辐射下绿色荧光表达情况及其将5 -FC转化为5- FU的能力.结果显示:构建的含有E8启动子及CD基因的重组慢病毒载体,包装的重组慢病毒滴度为2×108 TU/mL;经125I照射的重组慢病毒感染EJ细胞均可观察到绿色荧光,其细胞上清液均可检测到5- FC转化成的5- FU紫外峰,其中55.5 kBq及74.0 kBq 125I照射的细胞组绿色荧光明显,148 kBq125I照射的细胞组,其5 -FU紫外峰最为明显.以上结果表明:本工作所构建的放射敏感性启动子调控CD 基因/5 -FC自杀系统重组慢病毒载体具有电离辐射调控作用,可在125I的电离辐射作用下诱导下游基因表达,为放射性核素125I联合CD基因/5 -FC自杀系统对肿瘤细胞的治疗作用研究提供了实验基础.
125I、放射敏感性启动子、CD基因、GFP基因、慢病毒载体
25
R817(放射医学)
2012-12-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
165-170