降解多环芳烃芽孢杆菌NAPZ的萘诱导蛋白研究

摘要：

对降解多环芳烃的芽孢杆菌 Bacillus sp. NAPZ 进行了萘诱导蛋白的研究,以揭示此类细菌参与萘降解的关键蛋白组分及可能的降解机制.将NAPZ活化、培养、镜检,测量其在600 nm处的吸光值绘制生长曲线,选择指数生长期对NAPZ进行萘诱导,在特定时间收集菌体,浓缩后进行超声破碎,使蛋白释放,样品进行 SDS-PAGE 电泳和考马斯亮蓝染色,之后对电泳结果进行分析.形态学观察表明,NAPZ 为杆状细菌,革兰氏染色结果呈阳性,产芽孢.生长曲线显示培养8h 时细菌进入指数生长期,12 h时生长速率最大.对菌体破碎研究表明,超声破碎5 min(55 w,超声5 s,间隔10 s)效果较好.SDS-PAGE 电泳结果显示,与对照相比,诱导培养12 h 的 NAPZ 蛋白样品中12-1(Mr约53000)、12-2(Mr约51000)、12-4(Mr约36000)有明显表达量升高,另外出现一新增条带12-3(Mr约38000),其相对分子质量大小与诱导型龙胆酸双加氧酶一致,推测该菌可能通过龙胆酸途径降解萘,而不同于一般革兰氏阴性细菌的邻苯二酚途径.本研究对降萘芽孢杆菌 NAPZ 进行了生长曲线的测定和超声破壁条件的研究,并发现了诱导及非诱导条件下 NAPZ 蛋白表达量差异,初步推测高表达蛋白及新增蛋白与菌株对萘的降解利用有关.

关键词：多环芳烃、生物降解、芽孢杆菌、萘、诱导蛋白

分类号：Q939.9(微生物学)

在线出版日期：2013-03-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1980-1984