大肠杆菌JM105中硝酸盐还原酶的制备及其性质

摘要：

近年来,硝酸盐和亚硝酸盐的污染已引起普遍关注.目前,蔬菜和粮食的NO3-含量过高主要由于农药和化肥的使用、工业废水或生活污水灌溉等,食品类主要来自腌制食品和食品添加剂或防腐剂等.另外,向乳制品或食品中参碱、食盐、化肥、脏水、碱性水等也是硝酸盐污染的来源之一.因此,迫切需要快速、简便、可用于现场的硝酸盐检测方法.这就需仰赖生物酶方法,而生物酶方法的关键是酶制剂的制备和检测方法的建立.本研究通过筛选、厌氧和硝酸盐诱导培养、超声波细胞破碎和差速离心提取等方法,从大肠杆菌(Escherichia coli)JM105细胞膜中制备了硝酸盐还原酶并对其性质进行了研究.结果表明:从大肠杆菌JM105中制得的酶制剂活力很高,且在酶过量的情况下可将NO3-完全转化为NO2-,在用磷酸缓冲液清洗并冷冻保藏过夜后不含有亚硝酸盐还原酶.在加入黄素单核苷酸辅酶(FMN)后,该酶的活力可提高64%,比活力达0.42 U·mg-1蛋白.该酶十分稳定,在40 ℃下24 h活力无影响,在浓度为1 mmol·L-1 的Cu2+、Fe3+、Ca2+、Zn2+、Mg2+ 和 Mo6+存在下,其活力亦不改变.因此,该酶可用于测定食品、蔬菜和环境中硝酸盐的含量.

关键词：大肠杆菌、JM105、硝酸盐还原酶、硝酸盐检测、酶制剂

所属期刊栏目：16

分类号：Q814(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金40671105

在线出版日期：2007-08-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：958-963