基因宏阵列和荧光定量PCR方法对西瓜枯萎病害土壤中尖孢镰刀菌的快速检测和定量
采用基因宏阵列(Macroarray)和荧光定量PCR(Real-time PCR)的方法,对引起两瓜枯萎病害的病原菌尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)进行了快速监测和快速绝对定量,并且对实验条件进行了优化和摸索.结果显示,在西瓜枯萎病害发病较为严重的处理N-+P-和N-+P+的根际土壤中,Macroarray检测到强烈的阳性信号,表明尖孢镰刀菌的大量存在,同时荧光定量PCR的结果也表明在这两个处理的根际土壤中尖孢镰刀菌数量最多,分别为每g土壤8.89×105和2.24 × 105个拷贝数;而在末发生枯萎病害的处理N++P-和N++P+中,Macroarray末检测到阳性信号,根际土壤中尖孢镰刀菌数量分别为每g土壤6.23×103和3.28×103个拷贝数;而四个处理的土体土壤中尖孢镰刀菌的数量均维持在每g土壤102~103个拷贝数,Macroarray未检测到阳性信号.与传统检测方法如病原菌的分离培养、平板稀释计数等相比,上述分子生物学方法对病原真菌的检测和定量更为准确快速、省时省力.
尖孢镰刀菌、基因宏阵列、实时荧光定量PCR、SYBR Green I
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S154.38(土壤学)
国家自然科学基金40871126
2011-05-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
703-708