苦豆子对脂多糖诱导的RAW 264.7细胞炎症的抗炎作用和机制研究

摘要：

以RAW 264.7细胞为研究对象,探究苦豆子对脂多糖诱导的RAW 264.7细胞炎症的抗炎作用和机制.采用水煎煮、水超声、75％乙醇回流和75％乙醇超声分别制备苦豆子水煎煮提取物(water decocting extract,WDE)、水超声提取物(water ultrasonic extract,WUE),75％乙醇回流提取物(ethanol reflux extract,ERE)和 75％乙醇超声提取物(ethanol ultrasonic extract,EUE),D101大孔树脂吸附法制备苦豆子总生物碱提取物(total alkaloids extract,TAE)和总黄酮提取物(total flavonoids extract,TFE),水提醇沉法制备苦豆子总多糖提取物(total polysaccharides extract,TPE),通过酸性染料比色法、NaNO2-Al(NO3)3-NaOH分光光度法、苯酚-硫酸法分别测定TA、TF和TP的含量,并采用正交法初步设计 TAE、TFE 和 TPE9 种配伍组合(1∶1∶1、1∶2∶2、1∶3∶3、2∶1∶2、2∶2∶3、2∶3∶1、3∶1∶3、3∶2∶1、3∶3∶2),脂多糖(1μg/mL)诱导RAW 264.7细胞建立体外细胞炎症模型,利用细胞增殖检测试剂盒检测细胞活力,硝酸还原酶法检测一氧化氮的释放,酶联免疫吸附法检测细胞白介素-1β、白介素-6、肿瘤坏死因子-α的分泌,蛋白免疫印迹技术检测细胞p65 NF-KB、p-p65 NF-κB、IκBα、p-IκBα蛋白的表达.结果显示,TAE、TFE、TPE中TA、TF、TP的含量分别为94.79％、71.59％和73.51％.与模型组相比,WDE、WUE、ERE、EUE、TAE、TFE、TPE及其9种配伍组合显著降低了IL-1β、IL-6、TNF-α以及NO的释放,以TAE:TFE:TPE为2∶1∶2抑制效果最好,其极显著降低了 IκBα和p65 NF-κB的磷酸化水平(P＜0.01).综上所述,苦豆子对脂多糖诱导的RAW 264.7细胞炎症具有一定的抗炎作用,以TAE∶TFE∶TPE为2∶1∶2抗炎效果最佳,其通过抑制NF-κB信号通路的激活及下游炎症介质的转录表达,缓解LPS诱导的RAW 264.7细胞的炎症反应.

关键词：苦豆子、RAW 264.7细胞、抗炎、NF-κB信号通路

所属期刊栏目：35

分类号：R285(中药学)

资助基金：国家自然科学基金;甘肃农业大学伏羲杰出人才培育计划项目;现代农业产业技术体系

在线出版日期：2023-05-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：387-396