10.16333/j.1001-6880.2023.1.002
圣草酚调控Akt/mTOR通路对胶质瘤细胞自噬的影响
为研究圣草酚对胶质瘤细胞自噬的影响,探讨其通过调控Akt/mTOR通路在胶质瘤自噬过程中的作用.本研究采用CCK8和细胞克隆形成实验检测圣草酚对胶质瘤细胞增殖的影响.构建GFP-mRFP-LC3B稳定表达的细胞株,圣草酚(100 μmol/L)处理48 h,观察自噬小体的形成情况;然后分别用圣草酚(100 μmol/L)、雷帕霉素(200 nmol/L)以及圣草酚(100 μmol/L)+雷帕霉素(200 nmol/L)处理48 h后观察自噬流的情况.利用蛋白免疫印迹法检测圣草酚对自噬及Akt/mTOR通路相关蛋白表达水平的影响.建立裸鼠皮下移植瘤模型,观察圣草酚在体内对胶质瘤自噬过程的影响.实验结果显示,圣草酚能够显著抑制胶质瘤细胞的增殖,且呈时间—剂量依赖性(P<0.05).圣草酚使胶质瘤细胞中绿色自噬小体明显增多,LC3 Ⅱ、Beclin 1、ATG5蛋白表达上调.圣草酚处理GFP-mRFP-LC3B稳转细胞株48 h后呈亮黄色,且减弱了雷帕霉素对自噬流的促进作用,并上调P62蛋白的表达.此外,圣草酚可抑制p-Akt、p-mTOR的表达,但该作用被Akt激动剂740 Y-P逆转.体内实验结果同体外一致.说明圣草酚能够抑制胶质瘤细胞的增殖和自噬流,其影响自噬过程的作用机制可能与下调Akt/mTOR通路有关.
圣草酚、胶质瘤、自噬、增殖、Akt/mTOR
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R962(药理学)
重庆市应用创新与应用发展专项面上项目;重庆市自然科学基金
2023-05-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共9页
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