大黑花芸豆凝集素的分离纯化及温度、pH、色氨酸修饰对其活性的影响

摘要：

大黑花芸豆(Phaseolus multiflorus.Wiud)种子经匀浆、浸取、硫酸铵分级沉淀、阴离子交换层析(DEAE-Sepharose)、阳离子交换层析(CM-Sepharose)和Sepllacryl S-200分子筛层析得到凝集素样品(PML).经SDS-PAGE检测为一分子量约为28k的单一条带,Sephacryl S-100凝胶过滤测得其表观分子量约为56 kD表明PML是由两个相同亚基组成的蛋白.温度低于60℃时,PML较为稳定,当温度达80℃时,其凝血活性完全丧失;pH为5.6～9对活性影响不大,pH为12时,活性大部分丧失;高温和强碱对荧光光谱有较大影响.NBS修饰Trp结果表明,在天然状态下有3个色氨酸分子被修饰,其中第二和第三个色氨酸分子对其活性至关重要.

关键词：大黑花芸豆凝集素、分离纯化、温度、pH、化学修饰、凝血活性、荧光光谱

所属期刊栏目：20

分类号：Q501;R284.2(一般性问题)

资助基金：grants from the NationalNatural Science Foundation of China NSFC General Program 30000032

在线出版日期：2009-02-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：787-792