10.3969/j.issn.1006-7299.2016.02.014
顺铂对离体培养小鼠耳蜗毛细胞钙蛋白酶表达的影响
目的:观察顺铂对离体培养小鼠耳蜗毛细胞钙蛋白酶(calpain )表达的影响,探讨顺铂致耳蜗毛细胞凋亡的机制。方法取出生后3 d的昆明小鼠300只(600耳),分离出耳蜗基底膜600条,体外培养24 h后,随机分为对照组和4、8、16μg/ml顺铂组,每组150条;对照组加入2ml新鲜培养基,顺铂组分别加入2 ml含不同浓度顺铂(4、8、16μg/ml)的新鲜培养基,再继续培养24 h后,应用Hoechst 33258荧光染色观察耳蜗毛细胞凋亡情况,并应用免疫荧光染色和免疫印迹(Western blot)技术检测calpain 1(μ-calpain)和calpain 2(m -calpain)在耳蜗毛细胞的表达。结果4、8、16μg/m l顺铂组耳蜗毛细胞凋亡率分别为15.63%±0.20%、38.40%±2.64%和64.24%±0.05%,均高于对照组(5.55%±0.12%),呈现明显的量效关系;不同浓度顺铂组μ-calpain和m -cal‐pain的表达均较对照组明显增强( P<0.01),且m -calpain的表达随顺铂浓度的增高而明显增强( P<0.01)。结论顺铂可通过calpain通路诱导小鼠耳蜗毛细胞凋亡,从而发挥毒性效应。
顺铂、耳蜗、毛细胞、钙蛋白酶、小鼠
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R764.43(耳鼻咽喉科学)
辽宁省自然科学基金2014022029
2016-04-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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