NMF308nmf／nmf小鼠耳蜗毛细胞凋亡方式及z－VAD－FMK对毛细胞的保护作用

摘要：

目的：了解年龄相关性听力损失小鼠耳蜗毛细胞的凋亡方式，探讨半胱氨酸蛋白酶（caspase）抑制剂z－VAD－FMK [z － Val － Ala － Asp （Ome）－ fluoromethylketone]防治老年性聋的效果。方法选用新生NMF308nmf／nmf小鼠14只和成年同窝NMF308nmf／nmf小鼠32只，分为新生小鼠腹腔注射组（14只）、成年小鼠腹腔注射组（14只）和成年小鼠圆窗膜注射组（18只），各组又分为治疗组（注射z－VAD －FM K ）和对照组[注射二甲基亚枫（dimethylsulfoxide ，DMSO）]，采用圆窗膜局部和腹腔注射两种方法给药，给药前后行ABR检测，用免疫荧光染色化学技术TUNEL、caspase－3和PI（碘化丙啶）染色标记耳蜗毛细胞，观察各组耳蜗毛细胞的凋亡和存活状况。结果NMF308nmf／nmf小鼠从1月龄开始发生听力减退和毛细胞功能改变，到2月龄时，caspase－3激活表达的毛细胞凋亡现象是毛细胞凋亡出现的最早表现；TUNEL阳性标记特征稍晚出现；PI标记可见毛细胞细胞核固缩和碎片出现的时间从2月龄开始；到3月龄时该种小鼠听力基本丧失，耳蜗毛细胞严重缺失；而应用z－VAD －FM K治疗后，各治疗组小鼠ABR反应阈明显好于对照组；耳蜗毛细胞凋亡数目较对照组减少，存活数明显较对照组多，尤以圆窗膜注射组明显。结论 NMF308nmf／nmf小鼠耳蜗毛细胞的死亡方式以caspase－3凋亡途径为主，应用caspase－3抑制剂z－VAD －FM K定向内耳给药，可以阻断caspase－3信号途径激活所导致的毛细胞凋亡，从而有效防治老年性聋。

关键词：老年性聋、外毛细胞、凋亡、抗凋亡抑制剂、动物模型

分类号：R764.43+6(耳鼻咽喉科学)

资助基金：国家自然科学基金对外交流与合作项目30210103151;国家自然科学基金项目81170922;美国 NIH项目R01DC007392

在线出版日期：2015-02-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：50-56