10.3969/j.issn.1006-7299.2010.05.016
新生大鼠螺旋神经节细胞体外生长特点及脂质体介导的转染效率
目的 探讨螺旋神经节细胞(spiral ganglion cells,SGCs)体外生长规律及特点,并观察阳离子脂质体转染SGCs的情况.方法 从出生3~4 d的SD大鼠耳蜗中分离螺旋神经节组织,消化后放在含10%胎牛血清的DMEM/F12中培养.第2 d换用含2%B27及5ìmol/L阿糖胞苷的Neurobasal培养基纯化SGCs,取第4 d活性良好的细胞爬片后,通过免疫荧光法用NF-200抗体鉴定SGCs;另外用质粒pEGFP-C2联合Lipofectamine 2000转染SGCs,观察其转染效率及对细胞活性的影响.结果 体外培养的SGCs胞体饱满透亮,折光性好,一般能存活2周左右,第3~7 d活性最好.细胞对NF-200染色阳性;约10%的SGCs能被Lipofectamine 2000转染,但小部分细胞轴突缩短,甚至漂浮起来.结论 含B27的Neurobasal培养基能培养出活性良好的SGCs;脂质体和质粒pEGFP-C2能成功地转染SGCs,但转染效率较低,并在一定程度上影响细胞的活性.
螺旋神经节细胞、Lipofectamine 2000、转染、B27
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R339.16(人体生理学)
国家自然科学基金资助项目30672307
2010-11-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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