大黄素调控组蛋白乙酰化促进HpG2肝癌细胞焦亡及凋亡的发生
目的 研究天然产物大黄素是否能够影响HpG2肝癌细胞中组蛋白乙酰化水平,进而加速肝癌细胞焦亡和凋亡,为肝癌的治疗提供新的靶点.方法 CCK-8法检测不同浓度大黄素对HpG2细胞活力的影响;生物信息学分析TCGA数据库中肝癌患者组蛋白乙酰化相关基因表达情况,验证候选基因赖氨酸乙酰基转移酶2A(KAT2A)与细胞凋亡通路的相关性;实时荧光定量PCR(qPCR)检测HepG2细胞与L02细胞KAT2A mRNA水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大黄素对HpG2细胞中组蛋白乙酰转移酶(HAT)、组蛋白去乙酰转移酶(HDAC)、白细胞介素(IL)-1β、IL-18的影响;流式细胞术检测大黄素对肝癌细胞凋亡的影响;Western blot检测细胞凋亡、细胞焦亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2-相关X蛋白质(Bax)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶1(Caspase-1)、Gasdermin家族成员DN端(GSDMD-N)及KAT2A的表达情况.结果 大黄素能降低HpG2细胞活性,半抑制浓度(IC50)95%置信区间为58.12～66.52µmol/L.与正常肝组织相比,组蛋白乙酰化相关基因mRNA水平在肝癌组织中表达增高,且KAT2A变化倍数最大[log2(Fold Change)=2.010,P＜0.01];在肝癌组织中,KAT2A mRNA的表达与细胞凋亡通路呈负相关(rs=-0.230,P＜0.01).与L02细胞相比,KAT2A mRNA在HepG2中表达升高(P＜0.05);与对照组相比,大黄素干预组HAT和HDAC的表达水平下降,IL-18、IL-1β表达水平水平增高,细胞凋亡率升高,KAT2A、BAX的表达降低,Bcl-2、NLRP3、GSDMD-N及Caspase-1表达水平升高(P＜0.05).结论 大黄素可抑制肝癌细胞活力,加速细胞凋亡和焦亡,其机制可能与调控KAT2A表达相关.
大黄素、癌、肝细胞、乙酰化作用、乙酰基转移酶类、组蛋白类、细胞焦亡、细胞凋亡、KAT2A
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R285;R735.7(中药学)
贵州省科技厅项目;贵州省科技厅项目;贵州省卫生健康委科学技术基金项目;贵州省卫生健康委科学技术基金项目
2024-01-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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