气道类器官研究哮喘中Lkb1调控上皮再生的机制

摘要：

目的 通过气道类器官培养研究哮喘中肝激酶B1(Lkb1)调控上皮再生的机制.方法 取Lkb1f/f(对照组,10只)和Scgb1a1CreER;Lkb1f/f小鼠(Lkb1敲除组,9只),采用雾化吸入鸡卵清蛋白(OVA)的方法建立过敏性哮喘模型,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织,统计BALF中炎性细胞数量,肺组织切片免疫荧光染色比较钙激活氯离子通道蛋白3(CLCA3)阳性细胞数量.通过流式细胞术分选出Club细胞进行类器官培养,统计类器官的平均直径和类器官形成率,回收细胞通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测高脚杯细胞标志物CLCA3、纤毛细胞标志物叉头框蛋白J1(FOXJ1)和Club细胞中腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)的表达水平.结果 与对照组相比,Lkb1敲除组BALF中巨噬细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞数量变化差异无统计学意义;Lkb1敲除后CLCA3阳性细胞数量减少;类器官培养结果显示敲除Lkb1后Club细胞来源的类器官平均直径减小,类器官形成率降低,纤毛细胞分化标志物FOXJ1 mRNA表达水平降低,缺失Lkb1后Club细胞表达AMPKα水平降低,且Club细胞增殖受到抑制,激活Lkb1的下游信号通路AMPK可以减弱Lkb1缺失对Club细胞再生功能的影响.结论 Lkb1通过AMPK通路促进气道祖细胞增殖.

关键词：肝激酶B1、气道祖细胞、腺苷酸活化蛋白激酶、类器官培养、哮喘、细胞增殖

所属期刊栏目：52

分类号：R329.2+8(人体形态学)

资助基金：国家自然科学基金82070001

在线出版日期：2024-01-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：11-15