miR-101-3p靶向E2F2调控黑色素瘤细胞增殖的分子机制探讨

摘要：

目的 探讨miR-101-3p靶向E2F转录因子2(E2F2)调控黑色素瘤细胞增殖的作用机制.方法 使用GEPIA、OSskcm等数据库联合分析E2F2在黑色素瘤中的表达,并评估转录因子E2F2在黑色素瘤预后中的价值;利用短发夹RNA(shRNA)抑制黑色素瘤细胞MV3中E2F2表达后,分别采用PI染色和流式细胞术检测细胞周期的改变;Western blot实验检测细胞周期蛋白E(CyclinE)和细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)的表达水平;免疫荧光实验检测细胞中自噬相关蛋白LC3B的表达水平;裸鼠荷瘤实验观察黑色素瘤在体内生长的变化.经miR-101-3p mimics处理后,采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测MV3细胞中miR-101-3p的表达水平,同时利用qPCR和Western blot实验检测E2F2的表达水平;通过MTT、BrdU法检测MV3细胞增殖水平.结果 E2F2表达升高的患者预后更差(P<0.05);与shGFP组相比,shE2F2组中处于G0/G1期的细胞比例显著增多(P<0.05),CyclinE和CDK2的表达水平显著降低,自噬相关蛋白LC3B荧光信号明显减少(P<0.05),体内黑色素瘤形成质量显著降低(P<0.05);采用miR-101-3p mimics处理后,MV3细胞中miR-101-3p的表达水平明显升高(P<0.05),E2F2的mRNA和蛋白表达均显著低于NC mimics处理组(P<0.05),同时MTT结果 表明miR-101-3p mimics组MV3细胞的活力显著降低(P<0.05),BrdU标记试验结果 显示miR-101-3p mimics组细胞中BrdU阳性信号明显减少(P<0.05).结论 miR-101-3p可靶向E2F2并抑制其表达,进而降低黑色素瘤细胞增殖水平.

关键词：黑色素瘤、E2F2转录因子、细胞增殖、miR-101-3p

所属期刊栏目：50

分类号：R739.5(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金;贵州省科技计划项目;贵州省卫生健康委员会科学技术基金资助项目

在线出版日期：2022-11-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1121-1127