阿仑膦酸钠在地塞米松诱导C2C12细胞自噬中的作用机制探讨

摘要：

目的 探讨阿仑膦酸钠(ALN)在地塞米松(Dexa)诱导C2C12细胞自噬中的作用及机制.方法 以C2C12细胞为研究对象,设对照组(DMSO处理),Dexa组(100μmol/L Dexa处理),Dexa+ALN组(100μmol/L Dexa+1.0μmol/L ALN处理).分别以0、0.1、0.5、1.0μmol/L ALN处理C2C12细胞48 h后,采用CCK-8法检测C2C12细胞增殖水平,筛选ALN合适剂量;HE染色法检测C2C12细胞分化;采用Image J统计肌小管直径和融合指数;Western blot检测C2C12细胞肌蛋白肌球蛋白重链(MHC)、肌肉特异性环指蛋白1(MuRF1)和自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Beclin-1的表达变化;免疫荧光标记检测C2C12细胞MHC表达水平.结果 选取ALN合适剂量1.0μmol/L进行后续实验.HE染色和Image J结果显示ALN剂量为1.0μmol/L时,肌小管直径和融合指数显著增加(P<0.01).Western blot结果显示,与对照组相比,Dexa组细胞MuRF1蛋白表达水平升高;而与Dexa组相比,Dexa+ALN组MuRF1蛋白表达水平显著下调,自噬相关蛋白LC3、Beclin-1的表达增多(P<0.01).免疫荧光结果显示,与对照组相比,Dexa组MHC蛋白荧光表达强度(红光)明显降低;与Dexa组相比,Dexa+ALN组MHC蛋白荧光表达强度表达显著升高.结论 1.0μmol/L ALN能有效促进C2C12细胞增殖分化,改善Dexa对C2C12细胞分化的抑制作用,抑制肌降解蛋白MuRF1表达,其机制可能与适度激活自噬信号通路有关.

关键词：二膦酸盐类;地塞米松;自噬;Beclin-1蛋白;阿仑膦酸钠;C2C12细胞;信号通路

所属期刊栏目：49

分类号：R349.54(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：国家自然科学基金面上项目;天津市卫生健康科技项目;天津市卫健委中医中西医结合科研课题

在线出版日期：2021-10-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：921-925