靶向沉默TrkB基因对结肠癌细胞SW620失巢凋亡水平的影响

摘要：

目的 在结肠癌细胞SW620中靶向沉默神经营养因子酪氨酸激酶受体B(TrkB)基因以探讨其对肿瘤细胞的失巢凋亡水平的影响.方法 构建TrkB慢病毒干扰载体,使用TrkB-shRNA慢病毒感染SW620细胞,利用实时定量PCR和Western blot法分别检测TrkB基因在mRNA和蛋白水平表达量的变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测下调TrkB基因表达后贴壁和悬浮生长状态下细胞失巢凋亡率的变化.结果 成功构建TrkB-shRNA慢病毒干扰载体,获得SW620-iTrkB稳定感染细胞系.与SW620-iLuc对照组相比,转染SW620-iTrkB细胞中TrkB基因的mRNA和蛋白相对表达水平均降低(P<0.05).不同生长状态和不同转染质粒转染均对SW620-iTrkB细胞的失巢凋亡水平有影响,存在交互效应(P<0.05).与贴壁状态相比,悬浮状态下SW620-iLuc组和SW620-iTrkB组细胞凋亡率均明显上升(P<0.05);在悬浮状态下,SW620-iTrkB组细胞凋亡率明显高于SW620-iLuc组(P<0.05).结论 慢病毒载体介导的TrkB-shRNA能在结肠癌细胞SW620中产生特异性的基因沉默效应,显著增加细胞的失巢凋亡水平.

关键词：受体蛋白质酪氨酸激酶类、失巢凋亡、基因沉默、肿瘤转移、shRNA

所属期刊栏目：47

分类号：R735.3(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81472681

在线出版日期：2019-07-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：561-565