PDCD4表达下调通过pAKT/pGSK3β途径促进胃癌顺铂耐药的机制初探

摘要：

目的 探讨程序性细胞凋亡因子4(PDCD4)表达下调在顺铂诱导胃癌细胞凋亡中的作用机制,为胃癌的顺铂耐药提供新的分子靶点.方法 通过在人胃癌细胞系SGC7901中敲减表达PDCD4基因,顺铂诱导细胞凋亡,将细胞分为shNC组、shPDCD4组、shNC加药组和shPDCD4加药组,荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测PDCD4 mRNA表达水平;Caspase-3活性测定试剂盒、Hoechst染色结合细胞免疫荧光检测细胞凋亡水平;Western blot检测磷酸化蛋白激酶B (pAKT)和磷酸化糖原合成酶激酶3β(pGSK3β)蛋白表达水平.在细胞中加入特异性Akt抑制剂,将细胞分为shNC加药组、shPDCD4加药组、LY294002阻断组(转染shPDCD4质粒,先加LY294002再加入顺铂处理)和Wortmannin阻断组(转染shPDCD4质粒,先加Wortmannin再加入顺铂处理),Western blot检测聚ADP-核糖聚合酶(PARP)蛋白表达水平.结果 qRT-PCR和Western blot检测结果证实稳定转染ShPDCD4质粒的SGC7901细胞中PDCD4的mRNA表达和蛋白表达均有显著下降,体外稳定转染ShPDCD4的SGC7901胃癌细胞株构建成功.相较于shNC加药组,shPDCD4加药组Caspase3活性下降,细胞凋亡降低(P＜0.05).PDCD4表达下调将导致pAKT和pGSK3β的表达水平提高(P＜0.05),应用Akt抑制剂(LY294002、Wortmannin)阻断该信号通路后,PARP的相对表达水平重新上调(P＜0.05).结论 PDCD4表达下调能够通过pAKT/pGSK3β途径降低顺铂引起的胃癌细胞凋亡,进而促进细胞顺铂耐药的形成.

关键词：顺铂、抗药性、肿瘤、胃肿瘤、程序性细胞凋亡因子4、蛋白激酶B、糖原合成酶激酶3β

所属期刊栏目：47

分类号：R735.2(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81502637,81702639;湖北省科技厅知识创新专项自然科学基金2018CFB467,2015CFB240;湖北省卫生计生委科研项目WJ2019M052,WJ2019F065

在线出版日期：2019-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：454-458