抗IL-4R单链抗体原核表达载体的构建与表达

摘要：

目的 通过BL21(DE3)原核表达系统制备抗白细胞介素-4受体(IL-4R)鼠抗人单链抗体(scFv).方法在前期研究结果的基础上优化抗IL-4R scFv序列,优化后分析scFv序列,构建重组质粒pET-32a-scFv,将该重组质粒酶切鉴定,将其转入BL21(DE3)原核表达菌进行诱导表达,并进行SDS-PAGE分析检测,对表达蛋白进行纯化和复性,通过SDS-PAGE分析抗IL-4R单链抗体的分子质量,运用Western blot检测融合蛋白的特异性.结果插入pET-32a载体的scFv序列长度761 bp,抗IL-4R单链抗体的分子质量在45 ku左右,重组蛋白具有较高的特异性.结论本实验成功构建pET32a-scFv原核表达系统,重组蛋白具有较高的免疫反应性,为进一步研究抗IL-4R单链抗体作为药物靶点提供了工作基础.

关键词：受体、白细胞介素4、重组蛋白质类、电泳、聚丙烯酰氨凝胶、单链抗体、原核表达

所属期刊栏目：45

分类号：R34(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：贵州省教育厅创新群体重大研究项目黔教合KY字2016036;贵中医科院内[2016]31号;2011年贵州省社会发展科技攻关项目黔科合SY字20113020;贵州省委组织部高层次人才科研条件特助经费TZJF-2011年28号;贵州省高等学校工程研究中心项目黔教合KY字20153377;2012年贵州省科学技术基金黔科合[2012]2075号

在线出版日期：2017-09-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：897-901