癌胚抗原磷脂酰肌醇蛋白聚糖3单克隆抗体的制备及应用

摘要：

目的：制备抗癌胚抗原磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）单克隆抗体，并初步应用。方法利用PCR方法，将GPC3基因重组到原核表达载体pET16b中，在大肠杆菌中表达，纯化后的GPC3融合蛋白对Balb/c小鼠脾内包埋免疫，取小鼠脾细胞与Sp2/0细胞进行细胞融合，应用间接酶联免疫吸附测定（ELISA）和Western blot法筛选及鉴定分泌特异性抗GPC3单克隆抗体的杂交瘤细胞株，间接免疫荧光检测肝癌细胞中GPC3表达。结果成功构建了GPC3原核表达载体，在大肠杆菌中的诱导表达重组GPC3蛋白。应用单克隆抗体杂交瘤技术成功制备1株稳定分泌抗GPC3单克隆抗体的杂交瘤细胞株，通过Western blot鉴定具有高度的特异性，间接免疫荧光实验显示单克隆抗体能与HepG2细胞内GPC3特异性结合。结论成功制备出特异性抗人GPC3单克隆抗体。

关键词：磷脂酰肌醇蛋白聚糖类、抗体、单克隆、重组融合蛋白质类、杂交瘤、细胞系、癌、肝细胞、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3、单克隆抗体

分类号：R392.11

资助基金：天津市卫生局重点学科建设-重点实验室建设经费资助项目；国家临床重点专科建设项目资助课题

在线出版日期：2014-03-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：235-237