10.3969/j.issn.0253-9896.2011.04.003
Akt1和Akt2基因转染对人胃黏膜上皮细胞GES-1侵袭和迁移的影响
目的:观察蛋白激酶B1(Akt1)和蛋白激酶B2(Akt2)基因转染人胃黏膜上皮细胞系GES-1后对其侵袭和迁移的影响.方法:采用脂质体法将分别含Akt1和Akt2基因全长eDNA序列的p-LXSN-Akt1(Akt1组)和p-LXSN-Akt2(Akt2组)质粒转染到GES-1细胞,以转染P-LXSN空载质粒的细胞为空载组,以正常未转染细胞为对照组,并经抗生素G418筛选抗性克隆,蛋白印迹(Westernblot)鉴定各组细胞Akt1、Akt2及基质金属蛋白酶(MMP)-2的蛋白表达水平;Transwell法分析转染后细胞的侵袭能力;用免疫荧光法观察转染后GES-1细胞丝状肌动蛋白(F-actin)的变化.结果:Akt1组和Akt2组均获得了稳定表达Akt1和Akt2基因的GES-1细胞模型;2组MMP-2蛋白表达均高于空载组和对照组(P<0.01).Transwell法显示Akt1和Akt2组GES-1细胞侵袭能力均明显增加(P<0.01).免疫荧光发现Akt1和Akt2组F-actin的聚集均增加.结论:Akt1、Akt2基因均可以通过增加细胞侵袭力和迁移力,导致GES-1细胞恶性转化.
蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶、胃黏膜、上皮细胞、细胞系、基质金属蛋白酶9、肌动蛋白类、肿瘤转移
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R73;R71
天津市应用基础及前沿技术研究计划项目10JC-ZDJC18500
2011-07-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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