破骨细胞抑制性凝集素胞外段可抑制骨髓干细胞向破骨细胞分化

摘要：

目的:在大肠杆菌中表达人破骨细胞抑制性凝集素(OCIL)胞外段重组蛋白,体外检测表达的重组蛋白活性.方法:通过修改OCIL胞外段编码的碱基序列和重组PCR方法得到连续DNA片段;将表达载体pMAL-c2x/hOCIL转化入BL21(DE3)plysS宿主菌,IPTG诱导表达.利用直链淀粉亲和层析柱分离纯化,Western blotting鉴定重组蛋白.体外培养小鼠股骨骨髓细胞,在巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和核因子κB受体活化因子配基(RANKL)诱导骨髓细胞向破骨细胞分化的基础上,加入不同浓度的重组蛋白,观察其对破骨细胞样细胞生成的影响.结果:重组菌中确有融合蛋白MBP-hOCIL表达,其中目的蛋白占纯化液总蛋白的91.36%,纯化后重组融合蛋白产率为24.3 mg/L培养基;所制备的重组蛋白对小鼠骨髓破骨细胞样细胞的形成有抑制作用.结论:本研究通过基因工程的方法成功获得了hOCIL胞外段重组蛋白,此蛋白在体外可以明显抑制破骨细胞样细胞的形成.

关键词：破骨细胞、外源凝集素类、重组蛋白质类、大肠杆菌、巨噬细胞集落刺激因子、核因子κB受体活化因子、配体、骨髓细胞、小鼠

所属期刊栏目：38

分类号：R39;R73

资助基金：天津市自然科学基金重点项目07JCZDJC07500;天津市高等学校科技发展基金项目20050230

在线出版日期：2010-09-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：689-692