pRNAT-U6.1/Neo系统在E2F-3基因RNA干扰载体构建中的应用

摘要：

目的:构建针对E2F-3基因的siRNA表达载体.方法:化学合成3对编码短发夹RNA序列的、靶向E2F-3基因的寡核苷酸链,各64个碱基,退火、克隆到经BamHI、HindⅢ双酶切的pRNAT-U6.1/Neo载体上,重组构建RNAi质粒.通过双酶切、PCR鉴定及基因片段序列分析验证构建效果.结果:重组构建的pRNAT-U6.1/Neo载体经PCR分析及插入基因片段序列分析,结果表明64个碱基成功插入到预计位点,并且序列完全一致,插入序列无点突变位点.结论:载体的成功构建为进一步研究E2F-3基因在膀胱肿瘤中的作用奠定了基础,为进一步以其为靶点进行膀胱癌细胞系体外实验创造了条件.

关键词：RNA干扰、遗传载体、质粒、RNA、小分子干扰

所属期刊栏目：37

分类号：R33;R74

资助基金：国家自然科学基金资助项目30700834;天津市科技支撑计划重点项目07ZCGYSF05200;天津市高等学校科技发展基金计划项目20060122;天津市卫生局科技基金资助项目05KYZ60

在线出版日期：2010-01-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：829-831,后插1