10.3969/j.issn.0253-9896.2009.10.002
BMP2与BMP7嵌合表达产物可诱导成骨细胞分化
目的:构建骨形态发生蛋白(BMP)2与BMP7嵌合表达的分泌型基因载体pcDNA3-BMP2/7,检测表达产物的成骨诱导活性.方法:聚合酶链反应(PCR)扩增BMP2与BMP7的成熟肽编码基因,利用重叠延伸PCR以柔性肽(Gly_4Ser)_3编码序列使两者嵌合并克隆到质粒pcDNA3/sec上,转染CHO-K1细胞筛选得到稳定克隆,以其条件培养基处理鼠胚胎成纤维细胞C3H10T1/2,通过RT-PCR研究BMP2/7嵌合表达产物的活性.结果:BMP2/7嵌合表达产物可以明显提高C3H10T1/2细胞碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)、骨钙素(Osteocalcin,Oc)成骨细胞表型基因以及特异性转录因子Runx2 (runt-related transcription factor 2)mRNA的表达(P < 0.01).结论:制备的BMP2/7嵌合表达产物能够形成异源二聚体,诱导非骨源性细胞向成骨细胞分化.
骨形态发生蛋白质类、质粒、成骨细胞、基因表达、细胞分化
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R52;R78
国家自然科学基金资助项目30300171;天津市自然科学基金重点项目07JCZDJC07500;天津市高等学校科技发展基金20060207
2010-01-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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