稳定表达rhPDGF-BB的CHO细胞系的建立及其生物学特性研究

摘要：

目的:建立稳定表达人血小板衍化生长因子-BB(PDGF-BB)全长的中国仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞系,并检测表达产物的生物活性.方法:通过脂质体瞬间转染的方法将含有rhPDGF-BB全长的质粒转染CHO细胞系.利用抗生素筛选的方法使转染阳性的细胞扩增和单克隆化,进一步稳定传代.通过Western印迹法挑选高表达克隆,进而使用MTT法检测转染前后细胞增殖活性和转染细胞上清培养NIH 313细胞的增殖情况.反复传代、冻存和复苏鉴定表达的稳定性.结果:获得稳定且高效表达rhPDGF-BB的CHO细胞系;转染前后细胞生长速度存在差异,NIH 3T3细胞的增殖随转染细胞上清的浓度和培养时间的增加而增加.结论:pSELECT-GFPzeo-MCS载体能作为稳定表达的载体用于筛选.稳定表达rhPDGF-BB的CHO细胞具有新的生物学功能,实现了组织工程种子细胞的构建,为研究糖尿病溃疡创面愈合的生物材料提供实验基础.

关键词：血小板源性生长因子、CHO细胞、基因、转染、皮肤溃疡、糖尿病并发症

所属期刊栏目：37

分类号：R73;S

资助基金：中国博士后科学基金项目20070410766;天津卫生局科技基金项目07kz47

在线出版日期：2009-04-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：124-127