超抗原VEGF-SEA融合基因的克隆与表达

摘要：

目的:构建血管内皮生长因子-葡萄球菌肠毒素A(VEGF-SEA)基因的原核表达质粒,获得VEGF-SEA融合蛋白.方法:制备VEGF-SEA基因片段,插入pET40b构建重组质粒pET40b-VEGF-SEA,经序列分析正确后转化大肠杆菌B121(DE3),进行IVTG诱导表达蛋白.用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达蛋白的相对分子质量及表达形式,并对产物采用His?Bind Buffer kit试剂盒纯化.结果:获得VEGF-SEA基因片段长1 130 bp,经序列分析与预期完全一致,其表达出目的蛋白的大小约为66.2 ku,以包涵体形式表达,经纯化,纯度达到90%以上.结论:表达载体pET40b-VEGF-SEA构建成功,VEGF-SEA融合蛋白获得高效表达,本实验为进一步研究VEGF-SEA蛋白的活性及其功能,探讨超抗原抑制肿瘤生长作用奠定了基础.

关键词：血管内皮生长因子类、葡萄球菌属、肠毒素类、超抗原、基因表达、克隆、分子

所属期刊栏目：36

分类号：R73;R37

资助基金：天津市科委应用基础研究重点项目06YFJZJC02600

在线出版日期：2008-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：783-785