Exendin-4与绿色荧光蛋白融合基因的表达与活性研究

摘要：

目的:表达具有双功能特性的Exendin-4-GFP融合蛋白.方法:构建融合表达载体pET21a(+)/Exendin-4-GFP,转化大肠杆菌BL21后,以IPTG诱导融合蛋白的表达,并利用镍金属螯合层析树脂对其进行纯化.采用胰高血糖素样肽-1受体(GLP-1R)转染的CHO细胞考察融合蛋白的结合特性,并检测其生物活性.结果:含有融合表达载体的重组菌株诱导表达后,经SDS-PAGE及免疫印迹分析显示,31.0 ku的融合蛋白在大肠杆菌中得到了表达,且具有Exendin-4的抗原活性.受体结合实验表明,该融合蛋白能够与GLP-1R特异性结合,在488 nm激发光下呈现绿色荧光.体内活性实验表明,融合蛋白具有明显的降血糖活性.结论:本研究表达的Exendin-4-GFP融合蛋白同时具有Exendin-4的活性和荧光特性,为研究GLP-1受体功能以及Exendin-4与细胞相互作用的机制奠定了基础.

关键词：绿色荧光蛋白质类、基因表达、大肠杆菌、质粒、Exendin-4、胰高血糖素样肽-1受体

所属期刊栏目：36

分类号：R3(基础医学)

在线出版日期：2008-05-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：212-214,242