人类U5·116 ku蛋白基因片段的克隆

摘要：

目的:构建人类U5·116 ku基因全长真核表达质粒.方法:从HeLa细胞中提取总体RNA,一步法合成单链cDNA,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,扩增出人类U5·116 ku基因两段连续的序列,首先分别克隆至pTZ57R/T载体,两段序列连接成全长后再定向克隆至真核表达载体pcDNA3.1(-),构建pcDNA3.1(-)-U5·116 ku重组质粒.结果:RT-PCR法获得U5·116 ku基因两段连续的序列,长度分别为1 672 bp和1 246 bp,分别与pTZ57R/T载体连接后,选择合适的酶切位点再连接成全长序列,然后将全长序列和pcDNA3.1(-)真核表达载体进行连接、转化、酶切鉴定及序列分析后,证实pcDNA3.1(-)-U5·116 ku重组质粒构建成功.结论:成功克隆了人类U5·116 ku的编码基因,并构建了其真核表达质粒pcDNA3.1(-)-U5·116 ku.

关键词：HeLa细胞、基因表达、遗传载体、质粒、克隆、分子、逆转录聚合酶链反应、人、U5·116 ku蛋白

所属期刊栏目：35

分类号：R3(基础医学)

资助基金：国家自然科学基金30670441;30300070;天津市科委资助项目043802811;教育部跨世纪优秀人才培养计划NCET-04-0245;教育部高等学校博士学科点专项科研基金20040062003

在线出版日期：2007-07-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：401-404