10.3969/j.issn.0253-9896.2007.05.002
绿色荧光蛋白标记的人脂联素真核表达载体的构建
目的:构建绿色荧光蛋白(GFP)标记的人脂联素(Adiponectin)真核表达质粒.方法:用本实验室已构建好的人脂联素克隆载体pMD18-T/Adiponectin为模板,结合已设计好的特异性引物,采用PCR方法克隆出Adiponectin目的片段,将该目的片段再连至真核表达载体pcDNA3.1/CT-GFP-TOPO上,转化入TOP10感受态细胞中,通过筛选得到融合有绿色荧光蛋白的重组质粒pcDNA3.1/CT-GFP-TOPO-Adiponectin.结果:PCR获得长度为736 bp的目的片段,经pcDNA3.1/CT-GFP-TOPO真核表达载体连接、筛选及序列分析后,证实所插入的目的片段与gene bank检索的人脂联素cDNA序列(Accession NM-004797)100%匹配.结论:绿色荧光蛋白标记的人脂联素真核表达载体构建成功.
脂类、遗传载体、质粒、绿色荧光蛋白质类、聚合酶链反应
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R3(基础医学)
天津市教委资助项目2003025;天津市自然科学基金043609211
2007-07-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共3页
324-325,C2