重组人甲状旁腺激素相关蛋白1-141的表达和生物活性测定

摘要：

目的:建立表达及纯化重组人甲状旁腺激素相关蛋白1-141(rhPTHrP1-141)的方法.方法:将已构建好的表达载体pQE-30Xa/hPTHrP1-141重组质粒转化大肠杆菌M15 [PREP4],IPTG诱导表达,Western Blot鉴定表达产物.金属螯合亲和层析去除杂蛋白后,超滤离心进一步纯化目的蛋白.使用UMR106细胞测定所制备的rhPTHrP1-141对cAMP生成的刺激作用.结果:SDS-PAGE可见与预期大小相符的蛋白条带,Western Blot证实该条带即为rhPTHrP1-141.目的蛋白经纯化后,能刺激UMR106细胞内cAMP浓度升高,有剂量依赖关系.结论:成功建立了rhPTHrP1-141的制备及纯化方法,PTHrP1-141的表达量可达到60 mg/L培养基.表达产物经体外实验证实具有生物活性.

关键词：甲状旁腺激素相关蛋白质、重组蛋白质类、大肠杆菌、基因表达调控

所属期刊栏目：35

分类号：R4(临床医学)

资助基金：国家自然科学基金39970348;天津市自然科学基金993804211

在线出版日期：2007-03-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：33-36