10.3969/j.issn.0253-9896.2005.07.014
重组人胰岛素样生长因子1的制备
目的:建立人胰岛素样生长因子1(IGF-1)基因大肠杆菌高效表达系统及rhIGF-1的初步纯化方法.方法:将人IGF-1基因克隆人原核表达质粒载体pBV220,重组质粒转化大肠杆菌DH5α,温度诱导表达,Western Blot对表达产物进行鉴定.超滤离心纯化rhIGF-1,纯化产物行高效液相色谱分析.H3-TdR掺入法测定所制备rhIGF-1的促细胞增殖活性.结果:成功构建了重组质粒pBV-IGF-1,聚丙烯酰胺凝胶电泳可见与预期7.5 ku大小相符的蛋白条带,Western Blot证实该条带即为rhIGF-1.超滤离心一步纯化后rhIGF-1纯度即可达95%以上.H3-TdR结果显示,所制备的rhIGF-1可促进体外培养成肌细胞增殖.结论:成功建立了rhIGF-1的制备及纯化方法,表达产物经体外试验证实具有促细胞增殖的生物活性.
DNA、重组 胰岛素样生长因子1 大肠杆菌
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R3(基础医学)
天津市自然科学基金033801611
2006-02-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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