人甲状腺过氧化物酶抗原决定簇基因在 E.coli细胞中的表达

摘要：

目的:探索在E.coli BL21中表达hTPO抗原决定簇片段(AA568～AA874).方法:将hTPO抗原决定簇基因(1 702～2 622,编号相对于起始密码子)连接到表达型载体pGEX-4T-3,构建重组表达质粒.然后转化E.coli Bl21,IPTG诱导表达.表达产物采用亲和层析方法纯化,SDS-PAGE法测定其分子质量,ELISA法鉴定免疫学活性,考马斯亮蓝染色法定量.结果:成功地表达了hTPO抗原决定簇基因.纯化的GST-hTPO融合蛋白分子质量为61.4 ku,hTPO片段分子质量为37.6 ku.以此作为抗原按ELISA法分别与TPOAb阳性血清或阴性血清反应,结果表明GST-hTPO及hTPO片段均与TPOAb特异性结合.纯化的GST-hTPO产量为10 mg/L培养基;hTPO片段产量为1.2 mg/L培养基.结论:利用基因工程技术可获得高纯度的GST-hTPO融合蛋白及hTPO片段,产物具有良好的免疫学活性.

关键词：碘化物过氧化物酶、甲状腺、基因表达

所属期刊栏目：29

分类号：R5(内科学)

资助基金：天津市科委科技攻关项目963108411

在线出版日期：2006-02-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：732-735