一氧化氮合成酶的基因克隆与功能鉴定

摘要：

一氧化氮(NO)作为一种极其重要的生物信息分子,其合成依赖于一氧化氮合成酶(NOS),因此NOS在动植物体内发挥着不可替代的作用.本研究通过克隆海洋细菌Exiguobacterium aurantiacum JM-2的一氧化氮合成酶基因,利用Bam HⅠ和HindⅢ对目的基因和载体进行双酶切和连接,然后用热激转化法将目的基因转到大肠杆菌Top 10和BL-21中,使其成功表达,得到转化菌株,再利用IPTG诱导蛋白表达并进行蛋白纯化,最后对该蛋白的活性进行测定和分析.结果表明,当培养基中IPTG的最佳浓度为0.1 mmol/L、诱导时间为5 min时,NOS活性最大.

关键词：基因克隆、蛋白纯化、一氧化氮合成酶、活性测定

所属期刊栏目：29

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：天津市大学生创新创业训练计划项目;天津市科技计划项目

在线出版日期：2022-08-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：13-17