慢病毒构建的细胞系中过表达FRK对人脑胶质瘤细胞增殖、侵袭及迁移的影响

摘要：

目的:探讨在慢病毒构建的稳定表达酪氨酸相关激酶(fyn-related kinase,FRK)的细胞系中,过表达FRK对人脑胶质瘤细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响.方法:1.将FRK慢病毒质粒与辅助质粒共转染293T细胞进行慢病毒包装,然后用包装好的慢病毒感染胶质瘤U251、U87细胞,建立稳定表达FRK的细胞系,同时运用Western blotting(WB)技术检测FRK在U251、U87细胞系中的过表达情况;2.细胞划痕实验与Transwell迁移实验检测过表达FRK对脑胶质瘤细胞迁移能力的影响;3Transwell侵袭实验检测过表达FRK对脑胶质瘤细胞侵袭能力的影响;4.EdU实验与平板集落形成实验检测过表达FRK对脑胶质瘤细胞增殖能力的影响.结果:1.荧光显微镜下可见慢病毒感染U251、U87细胞的效率达到90％以上,WB结果显示外源性FRK蛋白在U251、U87细胞系中充分表达;2.细胞划痕实验显示:与空载体组相比,过表达FRK组U251细胞迁移的细胞数在24h和48 h分别减少了(50.00±1.04)％和(44.14±7.05)％,差异有统计学意义(P＜0.01);而过表达FRK组U87细胞迁移的细胞数在24 h和48 h分别减少了(58.50±4.12)％和(44.67±3.82)％ (P ＜0.001);3.Transwell迁移实验显示:与空载体组相比,过表达FRK组U251、U87细胞穿过滤膜的细胞数分别减少了(67.76±4.88)％和(50.76±4.54)％ (P ＜0.001);4.Transwell侵袭实验显示:与空载体组相比,过表达FRK组U251、U87细胞穿过Matrigel基质胶及滤膜的细胞数分别减少了(50.94±4.83)％和(57.92±6.19)％ (P ＜0.001);5.EdU实验显示:与空载体组相比,过表达FRK组U251、U87细胞的EdU阳性细胞率分别下降了(28.06±4.31)％和(33.51±7.26)％(P＜0.01);6.平板集落形成实验结果显示:与空载体组相比,过表达FRK组U251、U87细胞集落形成分别减少了(35.94±6.76)％与(52.33±7.42)％(P＜0.01).结论:过表达FRK可以抑制脑胶质瘤细胞的增殖,并且可以抑制胶质瘤细胞的侵袭和迁移能力.

关键词：胶质瘤、增殖、侵袭与迁移、酪氨酸相关激酶

所属期刊栏目：45

分类号：R739.41(肿瘤学)

在线出版日期：2017-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：539-546