人雌激素受体α真核表达载体构建及质粒免疫制备多克隆抗体

摘要：

目的:克隆构建表达人雌激素受体α(ERα)的真核表达质粒,并探讨通过质粒免疫的方法制备ERα抗体的可行性.方法:利用RT-PCR方法从MCF-7细胞中克隆出ERα基因,并将其构建在pCDNA3.1载体中,质粒经鉴定为正确后,大量提取重组质粒,利用脂质体转染试剂包裹,肌肉注射免疫BALB/c小鼠,通过测定血清抗ERα效价,观察重组质粒携带ERα在小鼠体内的表达情况.结果:成功克隆构建了表达ERα的真核载体,细胞内瞬时转染实验证实重组质粒成功表达目的蛋白；通过采用该质粒免疫小鼠,获得了高效价的小鼠多克隆抗体,经验证抗体可识别内源性ERα.结论:采用真核表达质粒进行免疫制备ERα抗体具有可行性,为进一步通过质粒免疫制备ERα单克隆抗体奠定基础.

关键词：雌激素受体、表达、基因免疫、多克隆抗体、小鼠

所属期刊栏目：41

分类号：Q78;R392.11(基因工程（遗传工程）)

资助基金：江苏省科技厅临床医学科技专项BL2012009;卫生厅科技兴卫工程ZX201110

在线出版日期：2013-11-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：705-708