软骨细胞与骨髓间充质干细胞隔离共培养构建组织工程化软骨

摘要：

目的 探讨隔离共培养条件下,软骨细胞诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)向软骨细胞分化并形成软骨组织的能力.方法 分别提取并培养兔BMSCs和耳软骨细胞,以5.0×107/ml的终浓度接种于聚羟基乙酸/聚乳酸(PGA/PLA)支架上并置于Transwell室内.实验组Transwell下方为贴壁软骨细胞,对照组Transwell下方为DMEM培养液(含10％胎牛血清).两组BMSCs-支架复合物体外培养8周后植入裸鼠皮下,继续培养6周后取材.通过大体观察、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测、组织学及免疫组织化学等相关检测对新生组织进行评价.结果 体外培养期间,实验组和对照组BMSCs在支架上黏附良好并能分泌细胞外基质,RT-PCR检测示实验组Ⅱ型胶原和蛋白聚糖有较强的表达,而对照组两者的表达较低或检测不到.裸鼠皮下培养6周,实验组BMSCs-支架复合物能基本保持原形,组织学染色及免疫组织染色显示新生组织有明显的软骨陷窝形成并表达软骨特异性细胞外基质.对照组BMSCs-支架复合物逐渐皱缩变形,未见形成软骨样组织.结论 采用Transwell隔离共培养的方法,软骨细胞能够诱导BMSCs向软骨细胞分化.

关键词：软骨细胞、骨髓间充质干细胞、共培养

所属期刊栏目：32

分类号：R614.2;R614.4(外科手术学)

资助基金：常州市卫生局重大课题资助项目2D201008

在线出版日期：2012-08-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：202-206