环氧合酶-2基因敲低对足细胞凋亡及nephrin蛋白表达的影响
目的 观察足细胞环氧合酶-2( COX-2)基因敲低对足细胞凋亡及nephrin蛋白表达的影响.方法 (1)以条件永生性小鼠足细胞株为研究对象:分为正常对照组、5μl的siRNA组、10μl的siRNA组、15μl的siRNA组.经诱导分化成熟,在干扰48 h后用半定量RT-PCR和Western bolt分别检测COX-2 mRNA及蛋白表达水平,用流式细胞仪检测足细胞凋亡水平.(2)以10μl的siRNA组作为研究对象,分别设立足细胞正常对照组、足细胞COX-2基因敲低组和足细胞阴性转染对照组,用Western bolt检测nephrin蛋白、BAX蛋白及BCL-X1蛋白的表达水平.结果 (1)与正常对照组比较,随着干扰浓度的增加,COX-2mRNA及蛋白表达逐渐减少,而足细胞的凋亡率逐渐升高,15 μl的siRNA组凋亡率明显增高.(2)1μl COX-2 siRNA转染组nephrin蛋白表达显著低于阴性转染组(P<0.05).(3)与阴性转染组相比,10μlCOX-2 siRNA转染组Bax蛋白表达显著上调,而Bcl-xl蛋白表达稍有下调.结论 敲低COX-2的基因表达可以导致足细胞凋亡,并随着干扰浓度的增加,足细胞凋亡率逐渐增加;在干扰浓度为10μl时,足细胞nephrin蛋白的表达下调;BAX蛋白上调及BCL-X1蛋白下调参与了足细胞的凋亡.
足细胞、细胞凋亡、基因敲低
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R692.02(泌尿科学(泌尿生殖系疾病))
苏州市科技计划项目SS0716;苏州工业园区孵化项目
2012-08-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
197-201