携带ePNP基因的减毒伤寒沙门菌的构建及目的基因胰腺癌细胞中的表达

摘要：

目的 构建含有pEGFP-C1-PNP质粒的减毒鼠伤寒沙门菌SL3261菌株,检测其在胰腺癌细胞BxPc-3中的表达.方法 PCR扩增得到PNP基因,构建真核表达载体pEGFP-C1-PNP,并进行酶切、PCR和测序鉴定.利用电转化法将重组质粒转入减毒鼠伤寒沙门菌SL3261,进行形态学和表面抗原稳定性检测.含质粒SL3261菌株与BxPc-3细胞体外共培养,利用荧光显微镜观察和RT-PCR检测绿色荧光蛋白的表达和PNP基因的转录.结果 目的基因正确连接pEGFP-C1中,并成功转入减毒鼠伤寒沙门菌,感染细胞亦检测到目的基因的表达.结论 成功构建了能携带ePNP基因真核表达质粒的SL3261菌株,且该基因能在胰腺癌细胞中正确表达.

关键词：减毒鼠伤寒沙门菌、嘌呤核苷磷酸化酶、真核表达载体

所属期刊栏目：32

分类号：R378.2+3(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2012-06-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：50-53,57