突变型胸苷激酶促进前体药物对小鼠T淋巴细胞的杀伤作用

摘要：

目的 研制表达单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSV1-TK)及其突变体HSV1-SR39TK的T淋巴细胞,探讨给予更昔洛韦(GCV)和阿昔洛韦(ACV)后T细胞的生存率.方法 采用磷酸钙沉淀法将慢病毒载体三质粒系统共转染来源于人胚肾的293T细胞,表达HSV1-SR39TK和HSV1-TK的T细胞与不同浓度的GCV和ACV培养3 d后,应用CCK-8法测定T细胞存活率.结果 包装后慢病毒载体的滴度超过106IU/ml、ACV/GCV浓度在1-10μmol/L时,SR39TK+T细胞的存活率下降明显,ACV组T细胞存活率从(98.4±2.7)%下降至(49.9±5.9)%,GCV组从(97.9±2.7)%下降至(33.7±5.3)%,差异均有统计学意义(均P<O.05).当ACV/GCV浓度进一步升高时,T细胞活率下降不明显.TK+T细胞对GCV敏感,T细胞活率从(97.9±2.7)%下降至(38.4±5.5)%,差异有统计学意义(p<0.05);但是对ACV不敏感,T细胞存活率从(98.4±2.7)%下降至(73.8±7.4)%,差异无统计学意义(P>0.05).IC50值测定结果显示,SR39TK+T细胞对GCV和ACV的敏感性高于TK+T细胞.结论 表达HSV1-SR39TK的T细胞对GCV和ACV的敏感性均较HSV1-TK高.突变型HSV1-TK在体外可促进前体药物介导的杀伤小鼠T细胞的作用.

关键词：单纯疱疹胸苷激酶、突变型、野生型、T细胞、慢病毒

所属期刊栏目：28

分类号：R392;Q755;Q782

在线出版日期：2009-01-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：720-723,后插2