重组腺病毒mIκBα基因的构建及体外抑制血管生成的作用

摘要：

目的 应用同源重组法构建mIκBα基因的腺病毒真核表达载体,探讨其体外抑制血管形成的作用.方法 通过Lipofectamine介导构建重组腺病毒pAdmIκBα,有限稀释法测定病毒滴度;以MOI为10、20、30、50感染HCC9204细胞,RT-PCR方法检测细胞NF-κB(p65)的表达,ELISA法检测细胞上清液p65的含量;鸡胚绒毛尿囊膜检测(CAM)了解pAdmIκBα对血管形成的抑制.结果 经PCR检测提示重组体腺病毒含有pAdmIκBα基因;pAdmIκBα的滴度是1.252×109 pfu/ml;将pAdmIκBα转染HCC9204细胞,当MOI=10时,p65 mRNA表达和上清液p65蛋白含量开始下降,在MOI=50时降低到最低水平;pAdmIκBα对p65表达的抑制呈剂量依赖性;pAdmIκBα对血管新生有很强的抑制作用,而且随着剂量的增加作用越发明显.结论 成功构建出含有mIκBα基因的具有感染能力的高滴度的重组腺病毒,并且该重组腺病毒具有体外抑制血管生成的作用.

关键词：变异型IκBα、重组腺病毒、血管生成

所属期刊栏目：26

分类号：R730.5;R392.2(肿瘤学)

在线出版日期：2006-10-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：543-546