胰岛素基因逆转录病毒载体在人骨髓间充质干细胞表达的实验研究

摘要：

目的构建携带胰岛素基因逆转录病毒载体,使其在人骨髓间充质干细胞(hMSCs)内稳定表达.方法通过RT-PCR法从人胰腺组织中提取胰岛素基因片段,并将其连接入逆转录病载体pLNCX,经包装细胞PT67的包装后,获得含外源性胰岛素基因的病毒颗粒(病毒滴度达4.2×106 cfu/ml)并感染hMSCs,经过G418筛选后,用RT-PCR法、免疫荧光法、放射免疫法、葡萄糖刺激试验分析胰岛基因的表达情况.结果携带胰岛素基因的逆转录病毒载体构建成功,转导入hMSCs后能够稳定表达胰岛素基因,并分泌至细胞外持续3周以上,但对葡萄糖刺激无明显反应.结论重组人胰岛素基因逆转病毒载体能够将胰岛素基因导入hMSCs并稳定表达.

关键词：间充质干细胞、骨髓、逆转录病毒载体、基因治疗

所属期刊栏目：26

分类号：R459.9;R344.8;R587.1(治疗学)

在线出版日期：2006-05-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：204-207