血管内皮细胞生长因子受体短发夹环RNA真核表达载体的构建

摘要：

目的构建血管内皮细胞生长因子受体(VEGFR)Flt-1和KDR特异性短发夹环RNA(ShRNA)真核表达载体.方法采用人U6SnRNA启动子,分别把被9 bp序列间隔的19 bp长短的Flt-1和KDR靶序列的反向重复序列,置于pEGFP-C1质粒载体中,分别构建成Flt-1和KDR短发夹环RNA,产生重组质粒pEGFP-C1/U6/Flt-1及pEGFP-C1/U6/KDR.分别用Pst和SalⅠ酶切鉴定;并将经酶切鉴定后的重组质粒作测序分析.结果 VEGF受体Flt-1和KDR的ShRNA片段被成功克隆进pEGFP-C1质粒中,SalⅠ酶切鉴定可切出400bp大小的片段,DNA测序分析显示,重组质粒ShRNA编码序列与设计片断的序列完全一致.结论针对Flt-1和KDR的特异性ShRNA真核表达载体PEGF/U6/Flt-1及PEGF/U6/KDR的成功构建,为进一步研究其基因功能打下了基础.

关键词：RNA干扰、Flt-1、KDR、短发夹环RNA、U6SnRNA启动子

所属期刊栏目：24

分类号：R394.3;R733.7

在线出版日期：2004-10-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：479-483