人脑源性神经营养因子成熟肽基因克隆及表达

摘要：

目的构建表达人脑源性神经营养因子hBDNF的基因工程菌.方法人工合成1对含EcoRI和BamHI限制性酶切位点的特异引物,以人血白细胞基因组DNA为模板.应用PCR技术扩增hBDNF成熟肽基因,用A-T克隆法与pUCm-T载体连接后,再定向插入原核表达载体pBV220,将重组体pBV220-hBDNF转化大肠杆菌DH5a,经42℃热诱导表达.结果经限制性酶切和DNA测序证明重组入载体中的DNA片段确为hBDNF,并成功表达出hBDNF蛋白.结论该研究成功地克隆出hBDNF基因编码序列并在大肠杆菌中获得稳定表达,表达效率达25%,为今后生物学活性的研究和神经系统疾病的基因治疗奠定了基础.

关键词：脑源性神经营养因子、PCR、A-T克隆、基因表达

所属期刊栏目：24

分类号：R394.8;Q782

在线出版日期：2004-09-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：326-328