10.3969/j.issn.1673-0399.2003.01.002
IV型胶原片段阻滞原的基因克隆及原核表达研究
目的克隆中国人阻滞原基因并高效表达.方法利用高保真聚合酶链反应(HF-PCR)从胎肝细QSD胞克隆IV型胶原α1链NC1结构域编码序列,即阻滞原基因,并进行序列分析.将阻滞原基因克隆入表达载体pQE-31,转化大肠杆菌M15[pREP4]并用IPTG诱导蛋白表达,蛋白电泳鉴定重组阻滞原蛋白.结果从胎肝细胞克隆的人阻滞原基因长687bp,编码229个氨基酸;大肠杆菌表达的重组阻滞原N-末端与载体编码的组氨酸标签形成融合蛋白;SDS-PAGE分析显示,经IPTG诱导后可出现28kd的目的蛋白条带,最高可占总菌体蛋白的32%.结论该法可成功克隆阻滞原基因,将有助于肿瘤血管抑制疗法的深入研究.
阻滞原、胶原、分子克隆、重组蛋白、血管新生抑制物
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R394-33;R73-3
2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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