miR-29a-3p靶向 SGMS2调控PCOS卵巢颗粒细胞慢性炎症的机制研究

摘要：

目的:探究miR-29a-3p/
SGMS2轴对人类卵巢颗粒样肿瘤细胞系（human ovarian granulosa-like tumor cell line，KGN）炎症反应的调控机制。
方法:通过构建并验证过表达和敲低miR-29a-3p及
SGMS2转染KGN细胞模型，双荧光素酶报告基因实验检测 miR-29a-3p与
SGMS2的结合；MTT法检测各组细胞的增殖；免疫荧光法观察增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）和Ki67蛋白荧光强度；流式细胞术检测细胞凋亡；酶联免疫吸附法检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白介素（interleukin，IL）-6、IL-1β和鞘磷脂的表达；Western blotting检测细胞中Caspase-3、cleaved-Caspase-3、
SGMS2和p-p65蛋白表达。
结果:miR-29a-3p与
SGMS2之间存在位点结合，且能够负向调控
SGMS2的表达水平。KGN细胞中过表达
SGMS2能够增高其吸光度值（
P=0.007），并增强其PCNA和Ki67蛋白的免疫荧光强度（均
P<0.001）；过表达
SGMS2能够降低KGN细胞的凋亡率（
P=0.001），升高炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β和鞘磷脂的表达水平（均
P<0.001）。过表达
SGMS2时KGN细胞中cleaved-Caspase-3、p-p65和
SGMS2蛋白表达量升高（
P=0.001，
P<0.001，
P<0.001）。而敲低
SGMS2时，以上结果具有与过表达
SGMS2相反的变化趋势。
结论:miR-29a-3p与
SGMS2之间存在靶向负向调节关系，
SGMS2能够促进KGN细胞的炎症反应，可为多囊卵巢综合征等妇科内分泌疾病的治疗提供靶点。

关键词：多囊卵巢综合征、miR-29a-3p、神经鞘磷脂合成酶2、卵巢颗粒细胞、炎症

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资助基金：国家自然科学基金82004401，81804138，82174422;黑龙江省中医药管理局科研项目ZHY2023-018;National Natural Science Foundation of China82004401, 81804138, 82174422;Heilongjiang Provincial Administration of Traditional Chinese Medicine Research ProjectZHY2023-018

在线出版日期：2024-01-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1032-1040