10.3760/cma.j.cn101441-20210628-00290
Galectin-1调节子宫内膜容受性的机制研究
目的:探讨Galectin-1 对子宫内膜容受性的影响以及在胚泡着床过程中所起的作用。方法:采用实时荧光定量PCR法、Western blotting及细胞免疫荧光法检测Galectin-1在高容受性子宫内膜细胞RL-95-2和低容受性子宫内膜细胞HEC-1-A中的表达及定位情况,通过Transwell实验和划痕实验检测两种细胞的侵袭和迁移能力。用JAR细胞模拟胚胎,测JAR细胞在RL-95-2和HEC-1-A上的黏附能力。将RL-95-2与HEC-1-A分别转染Galectin-1 siRNA和Galectin-1过表达载体后,Western blotting检测细胞中Galectin-1的表达水平、上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白)及WNT/β-catenin信号通路相关蛋白(β-catenin、WNT4a、WNT5a和WNT7a蛋白)的表达,同时检测细胞的侵袭、迁移情况。将转染后的细胞分别加入WNT通路抑制剂DKK1及激活剂氯化锂(LiCl),检测EMT和WNT相关蛋白表达水平及细胞的侵袭、迁移情况。结果:①RT-PCR和Western blotting结果显示,Galectin-1在RL-95-2中的表达量明显高于其在HEC-1-A中的表达(
P=0.020,
P=0.030);细胞免疫荧光实验显示,Galectin-1主要表达于RL-95-2细胞质,而在HEC-1-A细胞中,Galectin-1主要表达于细胞核。②细胞黏附实验结果表明,JAR细胞在RL-95-2细胞的黏附率明显高于HEC-1-A细胞(
P=0.010)。③Galectin-1过表达后,HEC-1-A细胞中E-cadherin蛋白表达量降低(
P=0.001),N-cadherin和Vimentin蛋白表达量升高(
P=0.003,
P=0.023);WNT相关蛋白β-catenin、WNT4a和WNT5a、WNT7a蛋白表达量升高(
P=0.025,
P=0.004,
P=0.005,
P=0.001),细胞的迁移能力、侵袭能力明显增强(
P=0.022,
P=0.003)。④DKK1处理过表达Galectin-1的HEC-1-A细胞后,与DKK1处理HEC-1-A细胞相比,E-cadherin蛋白表达量降低(
P=0.003),N-cadherin和Vimentin蛋白表达量升高(
P=0.015,
P=0.033),细胞的迁移能力以及侵袭能力均明显增加(
P=0.030,
P=0.040)。⑤RL-95-2细胞下调Galectin-1的表达后,E-cadherin蛋白表达量升高(
P=0.004),N-cadherin和Vimentin蛋白表达量明显降低(
P=0.030,
P=0.023),β-catenin、WNT4a、WNT5a、WNT7a蛋白表达量降低(
P=0.001,
P=0.005,
P=0.023,
P=0.020)。⑥LiCl处理下调Galectin-1表达的RL-95-2细胞后,与LiCl处理RL-95-2细胞相比,E-cadherin蛋白表达量增加,N-cadherin蛋白和Vimentin蛋白表达量降低(
P=0.012,
P=0.035,
P=0.020);细胞迁移率、侵袭数目降低(
P=0.040,
P=0.020)。
结论:与低容受性子宫内膜细胞相比,高容受性的子宫内膜细胞中Galectin-1的表达水平增加;Galectin-1可能通过WNT/β-catenin信号通路调控EMT相关蛋白的表达,从而影响胚胎的着床。
Galectin-1、子宫内膜容受性、WNT信号通路、上皮间质转化相关蛋白、滋养细胞
41
2023-05-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共11页
991-1001