人HoxA10基因真核表达载体构建和表达产物的鉴定

摘要：

目的:克隆人子宫内膜容受性标志分子HoxA 10基因的cDNA,转入真核细胞载体,并在293T细胞中进行表达和鉴定.方法:应用RT-PCR法从人子宫内膜组织中扩增HoxA10基因的cDNA编码区序列,将PCR产物克隆至pCMV-HA真核表达载体中,测序鉴定该载体.以LipofectamineTM2000将该载体转染入293T细胞中,Western blotting检测HoxA10蛋白的表达.结果:PCR扩增出的人HoxA10基因cDNA正确克隆到了pCMV-HA载体,成功构建了pCMV-HA-HoxA10重组载体;将其转染入293T细胞,用HoxA10和HA抗体进行Westem blotting,均检测到了融合蛋白的表达.结论:携带有HA蛋白标签的人HoxA10基因的真核表达载体pCMV-HA-HoxA 10克隆及表达成功,为进一步研究HoxA10与其它蛋白质的相互作用以及建立HoxA10的荧光素酶报告基因分析系统奠定了基础.

关键词：HoxA10基因、真核表达载体、293T细胞、HA标签、基因表达

所属期刊栏目：33

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金项目81200468;上海市科委基础研究重点项目12JC1405800;上海高校青年教师培养资助项目ZZjdyx12060

在线出版日期：2013-10-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：383-386,401