如何高效制备生殖系传递的嵌合体小鼠
目前,嵌合体技术已成为胚胎干细胞(ES细胞)和诱导多能性干细胞(iPS细胞)研究不可或缺的一部分,嵌合体小鼠模型主要用于基因功能、调控机制、致病机理等各方面的研究.要安全可靠地进行ES细胞和iPS细胞的各种应用性研究,首先需要验证细胞在体内向各种组织定向分化的能力,特别是生殖系传递的能力.而高效制备多能性干细胞生殖系传递的嵌合体小鼠,需要在分子水平、细胞水平、动物个体水平以及制备方法等各方面全面综合地分析考虑,才能达到实验设计的最优化.制备嵌合体小鼠主要有注射法和聚集法2种方法,各有利弊,在整个制备过程中,需要考虑不同发育阶段以及不同小鼠品系胚胎的分化潜能、选用远交系和杂交系的胚胎作为受体,同时要考虑ES细胞的遗传背景,选择低代次的远交系和杂交系的ES细胞或者iPS细胞,以及优选KSR培养体系.对于操作者,需根据实际情况,全方位地综合考虑,从而制定出合理的操作方案.
胚胎干细胞(ES细胞)、嵌合体、生殖系传递、诱导性多能性干细胞(iPS细胞)
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R394.33
国家"863"计划2011AA020116;国家杰出青年年科学基金81125003;上海市重点学科建设项目S30201;国家"973"计划2010CB945200;卫生部国家临床重点专科建设项目
2013-01-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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